從一個(gè)點(diǎn)光源發(fā)射的探測(cè)光通過透鏡聚焦到被觀測(cè)物體上，如果物體恰在焦點(diǎn)上，那么反射光通過原透鏡應(yīng)當(dāng)匯聚回到光源，這就是所謂的共聚焦，簡(jiǎn)稱共焦。其意義是：通過移動(dòng)透鏡系統(tǒng)可以對(duì)一個(gè)半透明的物體進(jìn)行三維掃描。共聚焦顯微鏡能提供無比準(zhǔn)確的三維成像，以及對(duì)亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和動(dòng)力學(xué)過程的準(zhǔn)確測(cè)試。

　　共聚焦顯微鏡在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(BeamSplitter)，將已經(jīng)通過透鏡的反射光折向其它方向，在其焦點(diǎn)上有一個(gè)帶有針孔的擋板，小孔就位于焦點(diǎn)處，擋板后面是一個(gè)光電倍增管。可以想像，探測(cè)光焦點(diǎn)前后的反射光通過這一套共焦系統(tǒng)，必不能聚焦到小孔上，會(huì)被擋板擋住。于是光度計(jì)測(cè)量的就是焦點(diǎn)處的反射光強(qiáng)度。

　　使用共聚焦顯微鏡，必須注意以下幾點(diǎn)：

　　①嚴(yán)格按照使用規(guī)程操作，不得任意改變操作程序，共聚焦顯微鏡中的激光發(fā)射管使用壽命有限且價(jià)格昂貴。所以，在操作使用過程中切記，在開關(guān)的啟動(dòng)順序以及在掃描過程中努力做到保護(hù)好激光管。

　?、谧⒁獠灰┞对谥械裙β屎透吖β实募す廨椛渲?，特別要注意不得注視激光束，甚至不要觀看樣品：不得在共聚焦顯微鏡附近儲(chǔ)存或使用易燃易爆物的同體、液體或氣體：可以引燃的材料如布或紙張不得放入光路中。

　?、坶_機(jī)或改變激光功率后，約需20min激光光源才能夠達(dá)到穩(wěn)定，關(guān)閉共聚焦顯微鏡系統(tǒng)時(shí)，先關(guān)閉計(jì)算機(jī)，等氬離予激光器風(fēng)扇關(guān)閉時(shí)，方可關(guān)閉系統(tǒng)開關(guān)。

　　④掃描后的圖像儲(chǔ)存在計(jì)算機(jī)內(nèi)，可作進(jìn)一步處理。由于計(jì)算機(jī)的硬盤有限，應(yīng)及時(shí)儲(chǔ)存到用戶軟盤上，但要警惕任何病毒浸染激光共聚焦顯微系統(tǒng)。使用前要嚴(yán)格把關(guān)，檢查軟盤是否攜帶病毒。